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    新型小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物抗P2RY12

    北京拜爾迪 (1000 x 120 像素)--2.jpg

    P2RY12(也稱為P2Y12)是一種腺苷5'-二磷酸(ADP)受體,也是嘌呤能G蛋白偶聯(lián)受體P2Y家族的成員。它在外周

    組織的血小板中表達(dá),也在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)小膠質(zhì)細(xì)胞(Homeostatic Microglia)中特異性表達(dá)。由于P2RY12幾乎

    不在巨噬細(xì)胞中表達(dá),所以它是用于區(qū)分存在腦血管周圍的巨噬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的有效標(biāo)志物1)。此外,ADP可用

    作細(xì)胞損傷的信號,小膠質(zhì)細(xì)胞中的P2RY12被認(rèn)為在接收神經(jīng)細(xì)胞損傷方面發(fā)揮作用。


    本產(chǎn)品為豚鼠來源多克隆抗體,可用于免疫組織染色的多重染色。


    外觀:液體

    濃度:蛋白濃度0.45~0.65 mg/mL


    1) Butovsky, O. et al.: Neurosci., 17(1), 131(2014).


    抗體信息

    image.png

    ※ 大鼠的染色實(shí)例請查看下方“數(shù)據(jù)”部分。


    Protocol(示例)


    1 灌注固定

    使用檸檬酸鈉/PBS灌注除血后,4% PFA灌注


    2 后固定

    4% PFA(~24 h)


    3 蔗糖替換

    30%蔗糖/PBS(4℃,過夜~約2天)


    4 制備冰凍切片

    去除蔗糖后,制備冰凍包埋塊,并用低溫恒溫器制備30 μm厚的切片


    5 封閉

    5%正常山羊血清,0.3% Triton X-100/PBS(4℃,過夜)


    6一抗

    抗P2RY12,豚鼠(1︰1,000),1%正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS(4℃,過夜~2 天)


    7 清洗

    0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)


    8 二抗

    Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG(H+L)(1:500)(產(chǎn)品編號:568-77901),1%正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS(室溫,2 h)


    9 清洗

    0.3% TritonX-100/PBS(5 min×3次)


    10 封裝

    封片劑封裝,4℃下避光存儲


    性能數(shù)據(jù)


    與抗Iba1抗體比較

    使用抗P2RY12抗體和抗Iba1抗體對小鼠大腦(冰凍切片)進(jìn)行免疫組織染色。

    image.png

    <數(shù)據(jù)提供>

    京都工藝?yán)w維大學(xué) 應(yīng)用生物學(xué)系 宮田老師


    使用抗體

    P2RY12

    一抗:抗P2RY12,豚鼠(產(chǎn)品編號:011-28873,本產(chǎn)品)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:568-77901)


    Iba1

    一抗:抗iba1,兔源(免疫細(xì)胞化學(xué)用)(產(chǎn)品編號:019-19741)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:566-80511)


    【結(jié)果】

    已確認(rèn)P2RY12信號和Iba1信號的共定位。


    鑒別小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞

    使用抗P2RY12抗體(小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物)、抗Iba1抗體(小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞標(biāo)志物)和抗層粘連蛋白抗體(腦血管基底膜標(biāo)志物)對小鼠大腦皮層和延

    髓末端的冰凍切片進(jìn)行三重染色,確認(rèn)細(xì)胞定位。

    image.png

    <數(shù)據(jù)提供>

    京都工藝?yán)w維大學(xué) 應(yīng)用生物學(xué)系 宮田老師


    使用抗體

    P2RY12

    一抗:抗P2RY12,豚鼠(產(chǎn)品編號:011-28873,本產(chǎn)品)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:568-77901)


    Iba1

    一抗:抗iba1,兔源(免疫細(xì)胞化學(xué)用)(產(chǎn)品編號:019-19741)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:566-80511)


    層粘連蛋白

    一抗:抗層粘連蛋白抗體(大鼠,宮田老師實(shí)驗(yàn)室制備)1︰200

    二抗:DyLight? 405 結(jié)合AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)(生產(chǎn)商編碼:112-475-003)


    【結(jié)果】

    Iba1陽性細(xì)胞中,腦實(shí)質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞呈P2RY12陽性,可能是小膠質(zhì)細(xì)胞(三角箭頭)。而Iba1陽性/P2RY12陰性的細(xì)胞存在于腦血管基底膜周圍,這些細(xì)胞可

    能是巨噬細(xì)胞(箭頭)。


    與抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體比較

    使用抗P2RY12抗體、抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體對小鼠大腦和脊髓(冰凍切片)進(jìn)行免疫組織染色。

    image.png

    使用抗體

    P2RY12

    一抗:抗P2RY12,豚鼠(產(chǎn)品編號:011-28873,本產(chǎn)品)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor? 647 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)(產(chǎn)品編號:566-78421)


    Iba1

    一抗:抗iba1,山羊源(產(chǎn)品編號:011-27991)1︰1,000

    二抗:Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) (產(chǎn)品編號:561-78351)


    TMEM119

    一抗:其他公司抗TMEM119抗體(兔源)1︰100

    二抗:Alexa Fluor? 594-AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:561-78471)


    【結(jié)果】

    與抗TMEM119抗體相比,使用FUJIFILM Wako的抗P2RY12抗體染色能更清晰地檢測細(xì)微的突起結(jié)構(gòu)。


    與其他公司產(chǎn)品比較

    使用本產(chǎn)品和其他公司的抗P2RY12抗體對小鼠大腦和脊髓(冰凍切片)進(jìn)行免疫組織染色。

    image.png

    使用抗體

    本產(chǎn)品

    一抗:抗 P2RY12,豚鼠(產(chǎn)品編號:011-28873,本產(chǎn)品)1︰1,000(抗體濃度:0.5 μg/mL)

    二抗:Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)(產(chǎn)品編號:562-78401)


    其他公司產(chǎn)品

    一抗:其他公司 抗P2RY12(兔源)1︰200(抗體濃度:0.5 μg/mL)

    二抗:Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L)(產(chǎn)品編號:567-78451)


    【結(jié)果】

    傳統(tǒng)產(chǎn)品中可觀察到神經(jīng)細(xì)胞的非特異性信號(三角箭頭),而本產(chǎn)品中幾乎檢測不到非特異性信號。


    應(yīng)用數(shù)據(jù)


    免疫組織染色

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    用戶反饋

    以下是研究人員提供的評估問卷結(jié)果。

    評價(原文翻譯)

    67ab016ce7d45.png


    產(chǎn)品列表

    品牌產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱等級規(guī)格
    FUJIFILM Wako015-28871Anti P2RY12, Guinea Pig
    抗P2RY12,豚鼠源
    for Immunochemistry10μL
    FUJIFILM Wako011-28873Anti P2RY12, Guinea Pig
    抗P2RY12,豚鼠源
    for Immunochemistry100μL


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