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    Annexin V-PE
    • 產品貨號:
      BN16065
    • 中文名稱:
      Annexin V-PE
    • 英文名稱:
      Annexin V-PE
    • 品牌:
      Biorigin
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • BN16065-1mL

      1mL

      ¥3536.00

    產品描述

    產品規格:1mL(200T) 

    儲存條件:4℃避光冷藏,請勿凍存。本產品在推薦條件下可以儲存 6 個月。

    光譜特性:Annexin V-PE: Ex/Em = 488/578 nm

    產品介紹 

    細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸( PS )從細胞膜內轉移到細胞膜外,使PS 暴露在細胞膜外表面。Annexin V 具有易于結合 到磷脂類如PS 的特性,對PS 有高度的親和性。因此,該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的PS。 

    Annexin V-PE 可以與7-AAD/PI等聯合使用,來檢測細 胞凋亡情況。7-AAD/PI 可被排除在活細胞和早期凋亡細胞之外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞可以同時被Annexin V-PE 和7-AAD結合染色呈現雙陽性,從而來區分活細胞、早調細胞與晚凋細胞。

    使用方法 

    1. 根據實驗要求誘導細胞凋亡。檢測樣品中應包含未經處理的細胞樣品,作為陰性對照。此外,設定一組樣品做單染,用于調節補償。 

    2. 沉淀細胞 懸浮細胞:1000 rpm,4 ℃離心 5 min 沉淀細胞;貼壁細胞:用不含 EDTA 的胰酶消化細胞, 1000 rpm ,4 ℃離心 5 min 沉淀細胞,胰酶消化時間不宜過長,以防引起假陽性。對于特定的細胞,如果細胞無法完全離心至離心管底,可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50 μL 左右的培養液,以避免吸走 細胞。

    注:用胰蛋白酶消化然后使細胞在最佳細胞培養條件和培養 基中恢復約30分鐘,然后在染色。 胰蛋白酶消化會暫時破壞質膜,允許Annexin V結合磷脂酰絲氨酸在細胞膜的細胞質表面上,從而導致假陽性染色。

    3. 加入約1mL 4℃預冷的PBS,重懸細胞,再次離心沉淀細胞,小心吸除上清。

    4. 用適當的緩沖液重新懸浮細胞,調節其濃度1-5×10^6/mL (緩沖液可選擇終濃度為 2mM Hepes/NaOH, pH7.4,28mM NaCl,0.5mM CaCl2溶液)。 

    5. 取100 μL 的細胞懸液于5mL流式管中,加入5μL Annexin V-PE 混勻后于室溫避光孵育5分鐘。 

    6. 加入10μL 20μg/mL的7-AAD或PI,并加400 μL PBS,立刻進行流式檢測。

    注意事項: 

    1. 熒光染料均存在淬滅問題,保存和使用過程中請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 

    2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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