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    DO Supplement-Met/-Trp
    • 產品貨號:
      BN25175
    • 中文名稱:
      DO Supplement-Met/-Trp
    • 品牌:
      Biorigin
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • BN25175-20g

      20g

      ¥498.00

      DO雙缺氨基酸

    產品描述

    一、酵母培養基種類及用途 

    一缺培養基 

         用于單質粒酵母轉化篩選,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質粒轉化。 

    二缺培養基 

         用于雙質粒酵母轉化篩選,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互補、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質粒轉化免疫共沉淀,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母雜交實驗, 接合型二倍體篩選。 

    三缺培養基 

         用于雙質粒酵母轉化篩選和報告基因檢測,外源基因在酵母中的表達、異源基因功能互 補、酵母單雜交和雙雜交報告基因檢測,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實驗后報 告基因分析(His3,Ade2)。 

    四缺培養基 

         用于報告基因分析,酵母雙雜交和酵母三雜交報告基因檢測,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實驗后報告基因分析(His3,Ade2)。 

    五缺培養基 

         用于報告基因分析和表型分析,酵母三雜交報告基因檢測(His3,Ade2)、酵母營養缺 陷型分離鑒定和表型分析。 

    六缺培養基 

         用于報告基因分析、表型分析和藥物毒理分析,酵母三雜交報告基因檢測、酵母營養缺 陷型分離鑒定和表型分析、藥物毒理分析。

    Rich medium 

         Rich medium 包括 YPD、YPDA、YPD Plus 系列培養基,也可以稱為完全培養基。 YPD Medium 由精選的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按適當比例混合組成;YPDA 培養基是 在 YPD 培養基中添加了適量的硫酸腺嘌呤;YPD Plus 相比于 YPDA 的營養更為豐富, 可直接用于釀酒酵母感受態的復蘇,可以提高轉化效率。YPD Agar、YPDA Agar 分別在 YPD、YPDA 基礎上加入了 Agar,作為固體培養基倒板用。YPD 系列培養基用于釀酒酵母 的常規培養。

    二、酵母培養基的配制 

    (1) Rich Liquid Media (Broth) 

         1. 取 50g 的 YPD/YPDA 加 1L 的去離子水中溶解; 

         2. 調節 pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 避光、室溫條件下儲存滅菌培養基。 

    (2) Rich Plating Media with Agar 

         1. 取 70g 的 YPD Agar/YPDA Agar 加 1L 的去離子水中溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解); 

         2. 調節 pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 冷卻到 50℃把培養基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

    (3) Minimal SD Base 

         1. 在 1L 去離子水中加入 26.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 避光、室溫條件下儲存滅菌培養基。 

    (4) Minimal SD Agar Base 

         1. 在 1L 去離子水中加入 46.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 冷卻到 50℃把培養基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

    (5) DO(缺陷氨基酸)類培養基的配制 

         1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 DO 培養基,然后再加入 26.7g Minimal SD Base,攪拌 溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 4℃冰箱避光儲存已經滅菌的液體培養基。

         或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應量的 DO 培養基,然后再加入 6.7g YNB,攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

         3. 4℃冰箱避光儲存已經滅菌的液體培養基; 

         4. 使用時再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。

    (6) SC(缺陷氨基酸+YNB)類培養基的配制

         1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 SC 培養基,然后再加入 20g 葡萄糖,攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 4℃冰箱避光儲存已經滅菌的液體培養基;

         或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應量的 SC 培養基,攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 4℃冰箱避光儲存已經滅菌的液體培養基; 

         4. 使用時再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。 

    (7) SD(缺陷氨基酸+YNB+葡萄糖)類培養基的配制 

         1. 在 1L 去離子水中加入相應量的 SD 培養基,攪拌溶解; 

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

         3. 4℃冰箱避光儲存已經滅菌的液體培養基。 

    (8) SD with Agar(缺陷氨基酸+YNB+葡糖糖+Agar)類培養基的配制 

         1. 在 1L 去離子水中加入相應量 SD with Agar 培養基,攪拌溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解);

         2. 調節 pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

         3. 冷卻到 50℃把培養基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

    注意事項: 

         1. 在配制酵母缺陷培養基時,培養基會變色,由淺黃到深褐色不等,對酵母的生長不會產 生嚴重影響。 

         2. DO 類和 SC 類培養基均不含葡萄糖。葡萄糖高溫滅菌會有碳化現象,控制好滅菌溫度和時間,葡萄糖的微量碳化對實驗并無太大影響。如有特殊要求可將 20%葡萄糖單獨滅菌,待使用時再加入。

         3. 缺陷培養基的 PH 值在 5.5-6.5 范圍內都是比較適合酵母生長的,此類試劑粉末的 PH 已 經過調試,使用時只需要稍微調整即可。


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