保存條件 

      10~25℃保存 12 個(gè)月。 

產(chǎn)品簡介 

      本試劑盒采用高效結(jié)合核酸的離心柱配合獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)，適合從 50~100 mg 普通植物中提取基 因組 DNA。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù)，提取過程中無需使用有毒的酚氯仿，整個(gè)提取過程只需 30~40 min，可最大限度去除植物組織中的雜質(zhì)，提取的基因組 DNA 片段完整、純度高，可直接用 于下游 PCR 擴(kuò)增、qPCR、分子標(biāo)記以及文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。 

產(chǎn)品特點(diǎn) 

  ? 操作簡便：30~40 min 內(nèi)完成數(shù)個(gè)樣品的基因組 DNA 提取； 

  ? 安全低毒：無需酚、氯仿等有毒試劑； 

  ? DNA 純度高：提取的基因組 DNA 無雜質(zhì)殘留，適用于對純度、完整性要求很高的下游實(shí)驗(yàn)。

適用范圍 

       本產(chǎn)品適用于普通植物樣品的基因組 DNA 提取。 

注意事項(xiàng) 

   1. 第一次使用前應(yīng)在 Buffer GP3 和 Buffer GW2 中加入無水乙醇，加入量請參考瓶上標(biāo)簽； 

   2. 植物組織樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的基因組 DNA 片段小且得率低； 

   3. 使用前請檢查 Buffer GP1 和 Buffer GP2 是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀，如有沉淀，請置于 37℃水浴 溶解搖勻后使用；

   4. 本試劑盒所有離心操作均在室溫下進(jìn)行。 

使用方法 

   1. 取植物新鮮組織 50~100 mg 或干重組織 20 mg，加入液氮充分研磨。加入 400 μL Buffer GP1 和 6 μL RNase A(10 mg/mL)，渦旋振蕩 1 min，室溫放置 10 min，使其充分裂解； 

   2. 加入 130 μL Buffer GP2，充分混勻，渦旋振蕩 1 min； 

   3. 12,000 rpm（~13,400×g）離心 5 min，將上清移至新的離心管中；

   4. 加入 1.5 倍體積的 Buffer GP3（使用前檢查是否已加入無水乙醇）（例如 500 μL 上清液加入 750 μL Buffer GP3），立即振蕩 15 s 充分混勻，此時(shí)可能出現(xiàn)絮狀沉淀但不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)； 

   5. 將上步所得溶液和沉淀分兩次加入到吸附柱DNA Columns 中（吸附柱放入收集管中），12,000  rpm（~13,400×g）離心 30 s，棄廢液，將吸附柱重新放回收集管中；

   6. 向吸附柱中加入 600 μL Buffer GW2（使用前檢查是否已加入無水乙醇），12,000 rpm（~13,400 ×g）離心 30 s，棄廢液，將吸附柱重新放回收集管中；

注意：如吸附膜呈現(xiàn)綠色，向吸附柱中加入 500 μL 無水乙醇，12,000 rpm（~13,400×g）離心 30 s， 棄廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

   7. 重復(fù)步驟 6；

   8. 12,000 rpm（~13,400×g）離心 2 min，棄廢液。將吸附柱開蓋置于室溫?cái)?shù)分鐘，以徹底晾干吸 附材料中殘余的漂洗液； 

注意：此步驟目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的殘留可能會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)（酶 切、PCR 等）。 

   9. 將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加 50~200 μL Buffer TE 或 ddH2O， 室溫放置 2~5 min，12,000 rpm（~13,400×g）離心 2 min，收集 DNA 溶液，如果要增加基 因組 DNA 的得率，可以將離心得到的溶液重新加至吸附膜上，重復(fù)洗脫。將洗脫的 DNA 溶液 置于-20℃保存。 

注意：如果下游實(shí)驗(yàn)對 pH 值或 EDTA 敏感，建議用 ddH2O 洗脫，若用 ddH2O 洗脫應(yīng)保證其 pH 值在7.0~8.5（可以用 NaOH 將水的 pH 值調(diào)到此范圍）；若需長期保存，推薦使用 Buffer TE 洗脫后置于- 20℃保存。

常見問題與解決辦法 

Q1：柱子出現(xiàn)堵塞？ 

A1：

   1) 樣品用量過多。建議按照說明書推薦量進(jìn)行提取； 

   2) 樣品富含多糖多酚類物質(zhì)。處理富含多糖多酚的組織，推薦用專用試劑盒； 

   3) 離心溫度過低。本產(chǎn)品使用操作均在室溫下進(jìn)行。 

Q2：DNA 提取得率低？ 

A2： 

   1) 樣品用量過少。建議按照說明書推薦量進(jìn)行提取；

   2) 樣品材料質(zhì)量不好。盡量選用新鮮組織樣品，樣品采集后應(yīng)液氮速凍，然后置于-80℃保存，建議盡快提取，避免反復(fù)凍融； 

   3) 樣品裂解不充分。若樣品過量則適當(dāng)減少樣品量，加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充分混勻，可適當(dāng)延長裂解時(shí)間。 

Q3：提取的 DNA 中有 RNA 污染？ 

A3：

   1) 未加入 RNase A 消化。請按照說明書要求加入 RNase A 消化；

   2) 樣品中 RNA 含量過多。可適當(dāng)增加 RNase A 用量或延長消化時(shí)間。