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    DiA(細胞膜綠色熒光探針)
    • 產品貨號:
      BN14059
    • 中文名稱:
      DiA(細胞膜綠色熒光探針)
    • 英文名稱:
      DiA(細胞膜綠色熒光探針)
    • 品牌:
      Biorigin
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • BN14059-50 mg

      50 mg

      ¥1500.00

    產品描述

    應用范圍:細胞膜熒光染料,主要用于細胞成像,細胞示蹤和追蹤

    產品參數 

    外觀:可溶于 DMSO 的紅色固體 

    λEx/λ Em(MeOH) =491/613 nm 

    CAS 號:114041-00-8 

    分子式:C46H79IN2 

    分子量:787 

    分子結構圖:

    image.png

    貯存條件 4℃ 避光保存,保質期 12 個月。

    產品介紹 

    DiA 是一種細胞膜綠色熒光染料,它在細胞膜中的擴散速度比 DiO 快,并且經常和 DiI 一起使用于細胞膜雙色標記。

    DiA 染色后可進行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地進行質膜染色。DiA 對固定細胞的染色效果比 DiO 好。

    使用方法 

    1. 染色液制備

    (1)配置無水 DMSO、無水 DMF 或 EtOH 儲存液:儲存液用無水 DMSO、無水 DMF 或 EtOH 配置濃度 1~5 mM。 DiO在DMSO和DMF中的溶解度比在EtOH中的溶解度高。

    注:①未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復凍融。②發現較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。

    (2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS 或 PBS)稀釋儲存液,配制濃度為 1~30 μM 的工作液。最常用的工作液濃度為 5-10 μM。

    注:工作液最終濃度建議根據不同細胞系和實驗體系來優化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內開始最優濃度的摸索。

    2. 懸浮細胞染色 

    (1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為 1 ×106/mL。 

    (2)37℃ 孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養時間不同。可以 20 min 作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記結果。 

    (3)孵育結束,1000~1500 rpm 離心 5 min。傾倒上清液,再次緩慢加入 37℃預熱的生長培養液重懸細胞。 

    (4)重復步驟(3)兩次以上。

    3. 貼壁細胞的染色

    (1)將貼壁細胞培養于無菌蓋玻片上。 

    (2)從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,但表面要保持濕潤。 

    (3)在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。 

    (4)37℃ 孵育細胞 2~20 min,不同的細胞最佳培養時間不同。可以 20 min 作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記結果。 

    (5)吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片 2~3 次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,孵育 5~10 min,然后吸干培養基,但要使表面保持濕潤。

    4. 結果檢測樣品可在培養基中進行檢測,可以通過熒光顯微鏡成像或流式細胞儀分析。

    注意事項 

    1. DiA 染色固定的細胞或組織樣品時,樣品宜使用配制在 PBS 中的 4% 多聚甲醛進行固定,使用其它不適當的固定液會導致熒光背景較高。 

    2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 

    3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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