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    NerveRedTM C2(FM4-64)神經元熒光探針
    • 產品貨號:
      BN14073
    • 中文名稱:
      NerveRedTM C2(FM4-64)神經元熒光探針
    • 英文名稱:
      NerveRedTM C2(FM4-64)
    • 品牌:
      Biorigin
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • BN14073-5mg

      5mg

      ¥2700.00

    • BN14073-5 x 1mg

      5 x 1mg

      ¥3200.00

    • BN14073-1mg

      1mg

      ¥720.00

    產品描述

    應用范圍:神經熒光染料

    產品參數 

    外觀:可溶于水的紫色固體 

    Abs/Em (in MeOH): 543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure) 

    Abs/Em (in membranes) :510/750 nm 

    貯存條件:-20℃避光保存 

    保質期:12 個月 

    分子式:C30H45Br2N3 

    分子量:607.51

    產品介紹 

    神經末梢探針是一系列陽離子型苯乙烯基熒光染料,用于跟蹤神經肌肉連接或突觸的突觸活動。這類染料通常具有親脂性尾部(兩個碳鏈)和帶陽離子的高親水性頭部。 NerveRed 系列探針是具有三個雙鍵的染料。

    陽離子苯乙烯基染料是通過活性依賴性染色突觸小泡來發揮功能。染料與細胞或組織共孵育時,染料的水相部分沒有熒光,而染料的親脂性尾部插入細胞膜并呈現強熒光。神經刺激后,在進行胞吞作用時,染料被包裹在囊泡內,因此,洗去細胞表面附著的染料后,熒光信號強弱表示新形成 的囊泡的數量的多少。反之,在胞吐作用時,染料與神經遞質一起從囊泡釋放,導致熒光信號減少。因此,熒光強度的變化反映了胞吞/胞吐或突觸活動的情況。內吞過程中熒光增加的速率——“結合速率”和胞吐過程中熒光減少的速率 ——“解離速率”因染料種類而異。通常,具有較長親脂性尾部和更多雙鍵的染料對膜具有較高的親和力,因此具有較高的結合速率和較低的解離速率。

    NerveRed C2 染料不能用于固定細胞染色,固定細胞的染色可選擇 NM 系列染料。

    實驗操作 

    以下是蓋玻片上培養的神經元細胞的神經末梢染色方案。

    神經末梢染料也可用于標記非神經元細胞類型的內吞囊泡。染色可以在 4℃進行以選擇性標記質膜; 在室溫或 37℃下,染料的內吞通常在 10 min 內發生。可以使用 Tyrode 溶液或其它緩沖液,可選擇性添加鈉離子通道阻斷劑河豚毒 素(TTX),其目的是阻斷動作電位,防止染色后的突觸囊泡釋放。用于特定實驗的最佳方案需要由實驗者摸索。

    1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀釋神經末梢染料至最終濃度為 4 μM。在室溫下將含有細胞的蓋玻片置于該溶液中 1 min,使細胞完全浸沒。 

    2. 將蓋玻片轉移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室溫下孵育 1 min。 

    3. 室溫下,用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反復多次洗滌蓋玻片。 

    4. 熒光顯微鏡下拍照觀察。

    image.png

    圖. FM4-64 在脂質體中的吸收和發射光譜。

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